您好,歡迎進入研域(上海)化學試劑有限公司網站!
一鍵分享網站到:
  • 技術文章ARTICLE

    您當前的位置:首頁 > 技術文章 > 學會這些問題,攻克ELISA試驗垂手可得!!!

    學會這些問題,攻克ELISA試驗垂手可得!!!

    發布時間: 2020-04-21  點擊次數: 89次

    Q1.標曲不顯色或顯色很弱,樣本顯色


    溶解標準品以及倍比稀釋時,未渦旋震動或不夠充沛。標準品溶解、倍比稀釋時均需要渦旋震動以確保充沛混勻。單純依托移液器重復吹打,效率較低、作用也不一定jia。


    Q2.標曲和樣本均不顯色


    在孵育階段靜置在桌面上,這樣非常不利于抗原抗體之間的充沛接觸,導致顯色偏弱。引薦孵育階段,運用ELISA專用的微孔板振蕩器,調至適宜的頻率,使抗原抗體充沛接觸,確保結合作用。


    Q3.標曲顯色,樣本不顯色


    當樣本中意圖蛋白濃度極低或許樣本中干擾因素較強,就無法檢測到。現在ELISA仍然是蛋白檢測靈敏度gao的方法,與不同技術結合后,衍生出了多種類型的ELISA,提高了檢測靈敏度。


    Q4.標曲和樣本都顯色,但復孔的CV大


    這個問題就跟移液器和試驗者的操作有關了。移液器的運用保護不標準,就會形成移液的差錯較大;試驗者自身的操作習氣、加樣的一致性對復孔的CV也有很大影響。把握移液器的正確運用和保護。關于個人的操作可操練移液動作、加快速度,確保移液的精密度。


    Q5.本底偏高,樣本值測不到


    標曲的本底即Blank孔的OD值一般要求控制在0.1以下(對于高敏ELISA可以適當放寬要求)。尤其是樣本值特別低的時分,本底過高會掩蓋意圖信號,導致無法測到樣本值。
    在參加TMB顯色后,需實時調查標曲顯se狀況。通常在S5孔有肉眼可見的微弱藍色,即可停止反應。


    Q6.樣本經不同梯度稀釋,核算得到的樣本值差異較大


    有時分我們不清楚樣本中意圖蛋白的濃度怎么,應該怎么稀釋,那么我們就會做下預試驗,確認稀釋倍數。然而有時分同一樣本做了幾個不同梯度稀釋后,核算得到的樣本值之間差異較大,應該選擇哪一個稀釋倍數呢?


    Q7.不同試劑盒中的組分能否通用


    除非是公用的試劑如洗液、檢測緩沖液,其它組分不主張用其它試劑盒的組分,乃至是同一指標不同批次的試劑盒里的組分。這些組分(包含標準品、標準品稀釋液、檢測抗體、酶等)都是經過優化的,假如貿然運用其它試劑盒的組分,有可能對結果產生影響。

產品中心 Products
在線客服 聯系方式

服務熱線

021-54479081
021-54461587

人力资源配置图
掃一掃訪問手機站掃一掃訪問手機站